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微量DNA快速回收試劑盒
産品簡介
微量DNA快速回收試劑盒适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA;也适合從(cóng)各種DNA反應液中回收DNA,能(néng)有效去除酶蛋白(bái)、引物(wù)、引物(wù)二聚體、單核苷酸、染料和無機(jī)鹽等雜(zá)質。獲得的DNA适用于酶切、連接、PCR和測序等分子生(shēng)物(wù)學實驗。
方法簡便,隻需溶膠或調整結合條件(jiàn)→結合→洗滌→甩幹乙醇→洗脫5個(gè)步驟。以平行處理4個(gè)樣品為(wèi)例,從(cóng)瓊脂糖凝膠中回收DNA隻需20分鍾;從(cóng)PCR産物(wù)中回收DNA隻需10分鍾。
有效回收DNA長(cháng)度範圍100 bp-15 kb,最大回收量4 μg,回收率為(wèi)60-90%,最小(xiǎo)洗脫體積15 μl。
有效回收量與起始樣品量
本試劑盒有效回收量為(wèi)0.5-4 μg雙鏈DNA。起始目的DNA量偏高(gāo)或偏低(dī)都會(huì)降低(dī)回收率。
PCR産物(wù)估算(suàn)方法:通(tōng)常PCR體系中上(shàng)下(xià)遊引物(wù)濃度各0.2 μM,理想條件(jiàn)下(xià)50%引物(wù)轉化為(wèi)目的産物(wù),即0.1 μM;
100 bp目的産物(wù)為(wèi)6.6 ng/μl;500 bp目的産物(wù)為(wèi)33 ng/μl;1 kb目的産物(wù)為(wèi)66 ng/μl,以此類推。
質粒酶切産物(wù)估算(suàn)方法:目的DNA量= 起始質粒DNA量 × 酶切後目的DNA長(cháng)度 ÷ 質粒DNA長(cháng)度
質粒DNA的純度、構型和酶切效率會(huì)影響起始DNA量的估算(suàn)。
産品特點
(一(yī))通(tōng)用
适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA;
适合從(cóng)各種DNA反應液中回收DNA,能(néng)有效去除酶蛋白(bái)、引物(wù)、引物(wù)二聚體、單核苷酸、染料和無機(jī)鹽等雜(zá)質。
(二)穩定
回收率與目的DNA長(cháng)度和起始量有關,但“回收率不穩定”通(tōng)常與凝膠種類、凝膠濃度和凝膠重量有關。我們考察了上(shàng)述因素,使用DK404均可獲得穩定的回收率,見(jiàn)下(xià)圖。
以1 μg 500 bp DNA片段為(wèi)起始樣品,使用DK404回收目的DNA的回收率:
(三)方便
方法簡便,見(jiàn)操作流程。以平行處理4個(gè)樣品為(wèi)例,從(cóng)瓊脂糖凝膠中回收DNA隻需20分鍾;從(cóng)PCR産物(wù)中回收DNA隻需10分鍾。