本公司提供的耐熱DNA聚合酶徹底去除宿主基因組DNA和表達載體DNA，避免由于酶本身的DNA殘留而導緻的假陽性；優化Buffer體系，提高(gāo)了PCR的靈敏度和特異性。

下(xià)表為(wèi)三種耐熱DNA聚合酶的基本特性：    

5'→3'外切酶活性：延伸至配對雙鏈區時延伸受阻，此時新合成的互補鏈上(shàng)形成“切刻”，5'→3'外切酶活性被激活：水(shuǐ)解“切刻”5' 堿基，同時在“切刻”3' 合成新的堿基，此過程稱為(wèi)“切刻平移”。Taqman探針法Realtime PCR正是利用Taq 5'→3'外切酶活性水(shuǐ)解探針，釋放(fàng)熒光(guāng)信号。

3'→5'外切酶活性：PCR延伸過程嵌入錯(cuò)配堿基時延伸受阻，3'→5'外切酶活性被激活：切除錯(cuò)配堿基，繼續延伸。但是3'→5'外切酶活性無法切除dUTP，并且pfu無法脫落，因此dUTP是pfu的不可逆抑制劑。dCTP會(huì)緩慢(màn)脫氨産生(shēng)dUTP，反複凍融會(huì)加劇此過程，因此應盡可能(néng)小(xiǎo)體積分裝dNTP以減少反複凍融次數。

突變與保真性：随機(jī)突變:Taq無3'→5'外切酶活性，延伸過程嵌入錯(cuò)配堿基時大多(duō)數情況是延伸終止，但有一(yī)定的概率延伸可以繼續，産生(shēng)随機(jī)突變。pfu和Taq Plus具有3'→5'外切酶活性，能(néng)避免因嵌入錯(cuò)配堿基造成的随機(jī)突變。

                      C:G→T:A突變:DNA鏈中的胞嘧啶(C)會(huì)緩慢(màn)脫氨為(wèi)尿嘧啶(U)，從(cóng)而産生(shēng)C:G→T:A突變，高(gāo)溫會(huì)加劇此過程，使用pfu或者Taq Plus無法避免這種突變。因此，應盡可能(néng)使用較少的循環數，以減少DNA鏈中C→U轉化比例，從(cóng)而減少C:G→T:A突變。

PCR産物(wù)末端加A：延伸結束後，Taq在合成産物(wù)的3' 額外添加A形成粘末端，後者可以與T載體3' T配對。