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96 微量DNA快速回收試劑盒
産品簡介
96微量DNA快速回收試劑盒适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA,有效回收DNA長(cháng)度範圍100 bp-15 kb,回收率為(wèi)60-90%,獲得的DNA适用于酶切、連接、PCR和測序等分子生(shēng)物(wù)學實驗。
方法簡便,隻需溶膠→結合→洗滌→甩幹乙醇→洗脫5個(gè)步驟。
結果穩定,凝膠種類、凝膠濃度和切膠重量等因素對回收率無明顯影響。
本試劑盒使用96 DNA吸附闆-A4回收DNA,完全避免個(gè)别孔可能(néng)被堵塞的情況,确保樣品提取的均一(yī)性。每個(gè)孔最大吸附量為(wèi)4 μg DNA,最小(xiǎo)洗脫體積為(wèi)25 μl,最大洗脫總體積為(wèi)140 μl。
有效回收量與起始樣品量
本試劑盒有效回收量為(wèi)0.5-4 μg雙鏈DNA。起始目的DNA量偏高(gāo)或偏低(dī)都會(huì)降低(dī)回收率。
PCR産物(wù)估算(suàn)方法:通(tōng)常PCR體系中上(shàng)下(xià)遊引物(wù)濃度各0.2 μM,理想條件(jiàn)下(xià)50%引物(wù)轉化為(wèi)目的産物(wù),即0.1 μM;
100 bp目的産物(wù)為(wèi)6.6 ng/μl;500 bp目的産物(wù)為(wèi)33 ng/μl;1 kb目的産物(wù)為(wèi)66 ng/μl,以此類推。
質粒酶切産物(wù)估算(suàn)方法:目的DNA量= 起始質粒DNA量 × 酶切後目的DNA長(cháng)度 ÷ 質粒DNA長(cháng)度
質粒DNA的純度、構型和酶切效率會(huì)影響起始DNA量的估算(suàn)。
産品特點
(一(yī))通(tōng)用
适合從(cóng)TAE、TBE瓊脂糖凝膠中回收DNA;
适合從(cóng)各種DNA反應液中回收DNA,能(néng)有效去除酶蛋白(bái)、引物(wù)、引物(wù)二聚體、單核苷酸、染料和無機(jī)鹽等雜(zá)質。
(二)穩定
回收率與目的DNA長(cháng)度和起始量有關,但“回收率不穩定”通(tōng)常與凝膠種類、凝膠濃度和凝膠重量有關。我們考察了上(shàng)述因素,使用DK491均可獲得穩定的回收率。
(三)方便
方法簡便,适合批量樣品處理,見(jiàn)操作流程。
操作流程