遊離DNA提取試劑盒

産品簡介

遊離DNA(或稱循環DNA，以下(xià)簡稱cfDNA)是一(yī)種無細胞狀态的、片段化的胞外DNA，存在于血液、滑膜液和腦(nǎo)脊液等體液中，主要以為(wèi)核小(xiǎo)體的形式存在，片段長(cháng)度主要為(wèi)178 bp及其倍數。cfDNA在正常人的血液中含量甚微，平均值為(wèi)13 ng/ml，而當機(jī)體在一(yī)些特殊狀态時(如患有腫瘤、自(zì)身免疫性疾病、感染性疾病、中風、心肌梗死及妊娠等)，其含量明顯上(shàng)升，比如惡性腫瘤患者平均值達到(dào)180ng/ml。

适合處理的樣品為(wèi)血清、EDTA-K₂、EDTA-K₃或ACD抗凝的血漿，不适合處理肝素抗凝的血漿。

    提供負壓抽濾和離心過濾兩種方式回收DNA：

          DK607-01 (50次)：負壓抽濾，最大處理體積為(wèi)4 ml，輕松獲得≥30 ng cfDNA。。

          DK607-S-50 (50次)：離心過濾，每次處理200 μl樣品，以孕婦血漿為(wèi)例，可獲得0.8-3.2 ng cfDNA。

産品特點

    Buffer CFDA可作為(wèi)樣品保存液，方便分次采樣和樣品的異地運輸；

    Buffer CFDA含DNA吸附基質，能(néng)有效去除細胞DNA；

    無需添加Carrier RNA，回收率約70-80%(見(jiàn)實驗示例)；

    DNA吸附柱-L6，可連接30 ml-擴容管，負壓抽濾快速完成DNA結合和洗滌步驟，在台式離心機(jī)上(shàng)完成洗脫步驟，最小(xiǎo)洗脫體積為(wèi)25 μl。

    DNA吸附柱-CS，最小(xiǎo)洗脫體積為(wèi)10 μl。

    cfDNA含量甚微，濃度低(dī)于Nanodrop等微量分光(guāng)光(guāng)度計和常規瓊脂糖凝膠電(diàn)泳檢測下(xià)限，建議使用Qubit熒光(guāng)計測定總DNA濃度，使用Agilent Bioanalyzer 2100電(diàn)泳并測定區域DNA濃度。如存在大量細胞DNA，前者明顯高(gāo)于後者，兩者的比例可作為(wèi)判斷能(néng)否進行後續實驗的依據之一(yī)。

    改進瓊脂糖凝膠電(diàn)泳方法可觀察178 bp核小(xiǎo)體單位DNA，同時能(néng)判斷是否有細胞核染色體DNA殘留。電(diàn)泳詳細方法：瓊脂糖凝膠電(diàn)泳鑒定遊離DNA