植物(wù)RNA小(xiǎo)量提取試劑盒

産品簡介：

植物(wù)RNA小(xiǎo)量提取試劑盒，适合從(cóng)≤100 mg植物(wù)樣品中提取RNA。

本試劑盒采用優化的裂解液Buffer RL快速裂解細胞釋放(fàng)RNA，配合β-巯基乙醇迅速滅活RNase。Buffer RL所含試劑成分能(néng)解離RNA與多(duō)糖和多(duō)酚等代謝産物(wù)形成的複合物(wù)，使RNA保持遊離狀态，方便後續操作。

預過濾柱-RD有效截留樣品碎塊和完整性較高(gāo)的基因組DNA；濾液中為(wèi)遊離的RNA，加入Buffer RBP調整結合條件(jiàn)，過濾槍頭去除可能(néng)析出的蛋白(bái)和多(duō)糖，大分子RNA(包括rRNA和mRNA)結合至RNA吸附柱-A，大部分小(xiǎo)分子RNA(包括tRNA和降解為(wèi)5S的小(xiǎo)RNA)不能(néng)被有效吸附而去除。

四種洗滌液分别去除殘留的雜(zá)質：Buffer WAR洗滌去除殘留的蛋白(bái)、色素；Buffer WD洗滌去除殘留的小(xiǎo)分子DNA、多(duō)糖；Buffer RW2洗滌去除殘留的鹽；無水(shuǐ)乙醇洗滌去除殘留的多(duō)酚和脂溶性色素。最後，用去離子水(shuǐ)洗脫獲得高(gāo)純度RNA，最小(xiǎo)洗脫體積15 μl。

産品特點：

成功提取大部分Trizol無法勝任的富含多(duō)糖、色素和酚類的樣品；

不使用酚和氯仿等有機(jī)試劑；

新鮮樣品獲得的RNA無明顯的DNA殘留；

方法簡便，可在30分鍾内完成RNA提取工(gōng)作。

使用RK101從(cóng)水(shuǐ)稻根尖中提取RNA

M：DL2000，1%Agarose；

A1：從(cóng)100mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA；

B1：從(cóng)200mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA；

C1：從(cóng)300mg水(shuǐ)稻根尖中提取RNA；

A2、B2、C2：對應A1、B1和C1 60℃水(shuǐ)浴10min，迅速放(fàng)入冰水(shuǐ)浴；

A3、B3、C3：對應A1、B1和C1加入RNase後60℃水(shuǐ)浴10min；

實驗結論：

1. 使用RK101提取的RNA二級結構未充分打開(kāi)，加熱能(néng)使二級結構均一(yī)化；

2. 大部分小(xiǎo)RNA被去除，逆轉錄可減少RNA用量，比如20 μl逆轉錄體系加入0.5 μg RNA。