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血液RNA&DNA小(xiǎo)量提取試劑盒
試劑盒組成包括血液RNA&DNA保護液(Buffer BR1, Cat#RP601),方便了樣品的分次收集、運輸和保存。
血液樣品與Buffer BR1按照(zhào)1:2.5的比例混合後室溫放(fàng)置2小(xiǎo)時,樣品中的DNA和RNA被固化為(wèi)容易被離心沉澱的粉末狀凝集物(wù)。
DNA吸附柱-RD選擇性吸附DNA,保留RNA于濾液中。濾液中加入乙醇調整結合條件(jiàn)後,RNA吸附柱-A有效吸附大分子RNA (包括mRNA和rRNA,不包括tRNA和降解為(wèi)5S的小(xiǎo)RNA)。
DNA吸附柱-RD和RNA吸附柱-A分别洗滌後,使用去離子水(shuǐ)或低(dī)鹽溶液分别洗脫DNA和RNA,可直接用于後續實驗。
本試劑盒适合從(cóng)≤1ml新鮮的人或哺乳動物(wù)全血,≤3ml凍存的人或哺乳動物(wù)全血中分别提取DNA和RNA,适合處理的血液為(wèi)EDTA-K2抗凝血,不适合處理肝素或者檸檬酸抗凝的血液。
RNA産量與應用: 3-8 μg RNA/ ml新鮮血液,1-2 μg RNA/ ml凍存血液;最小(xiǎo)洗脫體積15 μl。
已去除大部分tRNA和降解為(wèi)5S的小(xiǎo)RNA,可直接用于5`RACE和3`RACE。
DNA産量與應用:5-10 μg DNA/ ml血液;最小(xiǎo)洗脫體積50 μl。
純度低(dī)于血液基因組DNA提取系列試劑盒,可用于酶切和常規PCR。
本試劑盒也适合從(cóng)動物(wù)糞便和軟體動物(wù)腸道内容物(wù)中提取病毒RNA和DNA。
生(shēng)理鹽水(shuǐ)分散樣品,離心上(shàng)清中含病毒RNA和DNA。離心上(shàng)清與Buffer BR1按照(zhào)1:2.5的比例混合後室溫放(fàng)置2小(xiǎo)時,樣品中的DNA和RNA被固化為(wèi)容易被離心沉澱的粉末狀凝集物(wù),此過程可去除絕大部分PCR抑制成分。後續操作與處理血液樣品相(xiàng)同。
從(cóng)0.4ml新鮮全血中提取RNA
洗脫體積25 μl,電(diàn)泳體積2 μl,1×TAE,2% agarose,6.7 V/cm 15 min
從(cóng)新鮮血液中獲得的RNA無明顯的基因組DNA和5S RNA。
在非變性瓊脂糖凝膠中,28S RNA、18S RNA和5S RNA分别與2000 bp DNA、750 bp和100 bp DNA遷移率相(xiàng)似。
相(xiàng)關産品